DNA分选纯化试剂盒能从不同类型的水样中发现的所有微生物中分离总DNA和RNA,包括菌类和藻类,使用相同的柱子同时对RNA和DNA进行柱纯化。
DNA分选纯化试剂盒通过实时PCR(SYBR Green)检测大肠杆菌16SrDNA,通过提供的0.45μm水过滤柱过滤加入过量大肠杆菌的50mL水样,同时分离总RNA和DNA,并进行实时PCR。发现含有不同大肠杆菌量的所有测试水样都对应于实时PCR结果。通过大肠杆菌16S rDNA引物特检测到大肠杆菌,其浓度低至102cfu /ml,表明DNA的高质量和过滤系统的率。
通常情况下,DNA分选纯化试剂盒给出的参考磁珠用量都是略微过量的,因此需要增加磁珠用量改善吸附效率的情况并不多,但如果确定是磁珠用量不足导致的提取效果不好,是可以在一定范围内通过增加磁珠用量来改善提取效果的。
以GNT-02系列磁珠为例,在提取常量样本(植物组织,全血等)时,通常用量为10ul/次;在提取微量样本(如血清游离DNA,口腔拭子等)时,磁珠用量为15~20ul/次。
提取纯化试剂盒说明:
1、纯化柱-液体输入体积:
650ul;
2、洗脱体积:
100ul;
3、10个样品的纯化时间:
45minutes。
DNA分选纯化试剂盒基于SPRI(固相载体可逆化固定法)顺磁技术,通过调节磁珠和样本的体积比,可以选择性地结合不同大小的核酸片段,满足核酸不同长度范围的选择需求,适用于高通量测序中理想大小核酸片段的纯化和筛选。本产品兼容各DNA、RNA建库试剂盒,适用于各类下一代测序平台。
提取得到的核酸杂质过多时,使用者会考虑多进行几次洗涤,以得到更为纯净的核酸。增加洗涤次数确实有利于提纯核酸,但考虑到每次洗涤都会损失一定量的核酸,且增加了核酸断裂水解的可能性,所以一般来说洗涤次数控制在2~4次为宜。
DNA分选纯化试剂盒,单一纯化类试剂盒的洗涤次数为2次,植物、动物类试剂盒的洗涤次数为3次,血液类试剂盒洗涤次数为3~4次。
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