广州游离DNA 样本范围广

血浆病原DNA提取试剂盒提取的核酸纯度高。核酸纯度一般根据OD260/OD280比值来判断。一般说来，试剂盒提取的DNA其OD260/OD280比值应在1.6--1.8之间。
血浆病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取出洗涤液，按以下操作：
洗涤液A：21mL加入9mL无水乙醇；42mL加入18mL无水乙醇，混匀。
洗涤液B：9mL加入21mL无水乙醇；18mL加入42mL无水乙醇，混匀。
配制好的洗涤液如出现沉淀，可在37℃溶解，摇匀后使用。
2、取1.5mL离心管，加入200μL血液样本，再加入200μL 裂解液及40μL 消化液，振荡混匀，65℃水浴10 分钟。
3、加入150μL异丙醇（总体积的25%），混合均匀，如有半透明悬浮物，不影响DNA的提取与后续实验。
4、将吸附柱放入收集管内，将上述溶液转入吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液；
5、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液A至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
6、将吸附柱放回收集管内，加500μL 洗涤液B至吸附柱内，12,000 rpm 离心1 分钟，弃收集管内废液。
7、按每份样本40μL 取洗脱液，放置于灭菌1.5mL离心管，65℃预热。
8、将吸附柱放回收集管内，12,000 rpm 离心2 分钟，离去残留的洗涤液。
9、取出吸附柱，放入新的1.5 mL 灭菌离心管内，在吸附柱中心加入40 μL 预热洗脱液，静置2分钟，12,000 rpm 离心1分钟，收集DNA溶液。提取的DNA即可用于下一步实验或-20℃保存。

血液游离DNA（又称血液循环DNA）是指血液中游离于细胞外的DNA，其来源主要有三：白细胞崩解释放的DNA、坏死组织特别是肿 瘤组织释放入血液的DNA和感染病毒等的DNA。近几年来，随着基因诊断技术的发展，游离核酸的应用价值越来越大，如优生筛查、早期诊断、遗传病检测和病原体感染基因检测等。但血液中游离DNA含量一般较低，片段较小，不易提取，这大大影响了游离核酸的基因检测和各种研究的开展。

在选择DNA提取试剂盒时，较重要的变量可能是你所使用的生物体。
1、许多试剂盒都有用于DNA分离的不同成分，这些试剂盒之间的主要区别在于细胞是如何被分解的，因为有些比其他更更有挑战性。例如，形成生物膜的可能比传统的基于去垢剂的方法需要更强的裂解技术。
2、动物组织：用于动物组织DNA分离的试剂盒通常具有更温和的裂解技术，因为大多数动物细胞不像细胞那样有细胞壁。然而，动物组织DNA提取的挑战往往在于选择合适的组织匀浆方法。此外，许多动物DNA纯化试剂盒不使用/氯仿萃取或乙醇作为沉淀步骤，以减少破坏DNA的风险。
3、植物：当涉及到植物DNA分离时，必须考虑到其他一些因素，需要注意污染物的去除。植物在纯化过程中通常含有未分离的糖，因此，洗涤剂选择性地与DNA结合并从溶液中析出，通常是先将洗涤剂溶解在高浓度的盐溶液中，然后提取DNA。
4、血液：由于技术上的许多新进展，血液DNA分离试剂盒中有多种裂解技术和提取方法可供选择。从血液中分离出的DNA将在很大程度上决定你使用的裂解和提取的类型。无论应用是什么，一定要选择一种能够提供纯净、完整、双链和浓缩DNA的试剂盒，以获得较好地效果。

血浆病原DNA提取试剂盒采用特别的裂解液配方，可直接从新鲜、冷冻或陈旧的全血中提取高质量的基因组DNA，也可以直接提取得到血液中感染的细胞DNA， 省去了一般血液DNA提取试剂盒所需的白细胞分离步骤，操作简便快速，只需几十分钟左右即可完成血液DNA提取，并且DNA提取得率较高，可在200 μl 全血中提取2-5ug左右基因组DNA。血浆病原DNA提取试剂盒采用了较新的优良离子膜、裂解液和洗脱液，经过多次优化，提取得到的DNA纯度更高，较大限度地去除了蛋白、色素、脂类等杂质污染，可以直接应用于PCR、荧光定量PCR和各种酶切试验等。

血浆病原DNA提取试剂盒有较高的提取得率。核酸提取得率的确定，常用的是使用紫外分光光度计的方法。但是，血清、血浆样本中游离核酸含量较低，如果直接用紫外法检测，得出的数值并不准确，而且多次测量的结果会变异很大。关于提取得率，1ml正常血浆样本cfDNA得为7.35ng左右，但如果白细胞大量凋亡，血浆中的游离DNA量会有所增加，病人血浆中的DNA会大幅增加。

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