苏州病原DNA提取 兼容多种病原类型

经体液病原DNA提取试剂盒分离的DNA适用于多种下游应用，包括PCR、Real-Time PCR、mNGS文库构建等，为科研及体外诊断提供**。
一般来说，核酸分离方法包括酚仿抽提法、冻融法、煮沸法和硅胶膜吸附、磁珠分离等，提取步骤中一般含有细胞裂解、沉淀，离心、漂洗、洗脱、溶解核酸等过程。目前在体液病毒DNA的提取过程中，一般采用硅胶膜吸附或磁珠分离法，经常会用到蛋白酶k加热消化、处理、含醇洗液漂洗、加热洗脱等步骤，操作较为繁琐，现有的一些试剂盒含有具有一些有毒物质，会损害人体健康。另外，受到洗脱液体积的影响，往往难以将回收到的dna全部用于检测，进而影响了检测灵敏度。

体液病原DNA提取试剂盒使用事项：
1、样本体积不足200ul可以加入0. 9% NaC1补足。
2、为确保样本有效裂解，加入BufferGB后，需将样本与Buffer GB充分混匀。
3、如果环境温度**过25"C，无水乙醇应在冰上预冷后使用。
4、Buffer GD中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
5、如需进一步提高DNA 纯度，可重复步骤一次。Buffer PW中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
6、为增加洗脱效率，可将洗脱液在50~60C预热。如需使用去离子水洗脱，可用NaOH调整其pH值在7.0~8.5之间，为了增加DNA回收率，可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置2min，再次离心收集。

体液病原DNA提取试剂盒结合在硅基质膜或磁珠表面的DNA，经含醇的盐溶液漂洗可进一步去除细胞残片、非特异吸附的蛋白质和过浓的盐离子，再经纯水等洗脱液即可将纯度较高的DNA洗脱下来，进而应用于下游实验中（如pcr、酶切、连接、测序等）；通过酚仿释放至溶液中的核酸，可通过调节酸碱度后加入高浓度醇溶液沉淀出来，再经醇溶液洗涤晾干后即可获得高纯度DNA。

体液病原DNA提取试剂盒适用于从新鲜或冷冻的血浆、血清和无细胞体液中提取高质量的DNA。*使用氯仿等抽提，特有的缓冲液/蛋白酶K体系能迅速裂解病毒，使病毒蛋白与DNA分离，在蛋白酶K的作用下降解病毒蛋白，在高盐状态下将DNA选择性吸附于硅基质膜上，再通过快速的漂洗、离心步骤，去除蛋白等杂质，然后低盐的洗脱缓冲液将高纯度的DNA从吸附柱膜上洗脱下来。

体液中病原dna的提取步骤中，去污剂用于破坏细胞或病毒蛋白外壳或膜结构，使核酸游离到溶液中，胍盐或盐用于变性蛋白质，释放其结合的核酸并促进核酸与硅基质膜或磁珠结合，同时也具有裂解病毒外壳或膜结构的功能，如果使用溶剂，也可以破坏细胞结构，变性蛋白质进而释放核酸。
体液病原DNA提取试剂盒保存条件：常温运输和保存，长期放置时（1月以上）应该放4℃。且具有挥发性，使用后需要将瓶盖拧紧。

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