质量优 纯度好 兼容多种病原类型

体液病原DNA提取试剂盒采用核酸提取技术，配合顺磁性磁珠和特缓冲液系统，操作过程安全便捷，能够较大程度去除蛋白、脂质及其他杂质。
一般来说，核酸分离方法包括酚仿抽提法、冻融法、煮沸法和硅胶膜吸附、磁珠分离等，提取步骤中一般含有细胞裂解、沉淀，离心、漂洗、洗脱、溶解核酸等过程。目前在体液病毒DNA的提取过程中，一般采用硅胶膜吸附或磁珠分离法，经常会用到蛋白酶k加热消化、处理、含醇洗液漂洗、加热洗脱等步骤，操作较为繁琐，现有的一些试剂盒含有具有一些有毒物质，会损害人体健康。另外，受到洗脱液体积的影响，往往难以将回收到的dna全部用于检测，进而影响了检测灵敏度。

体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、取1.5ml离心管(自备)，加入20ul的Proteinase K溶液。
2、向离心管中加入200 ul血清或血浆，然后再加入200 ul BufferGB，涡旋震荡15 sec。
3、56°C孵育15 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
4、加入250ul无水乙醇，涡旋震荡15sec，室温放置5 min，短暂离心，将管壁上的溶液收集到管底。
5、将一个Spin Columns CG“放入Collection Tubes(2 m1) 中，将上一步所得溶液转移到离心吸附柱中，10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中的废液。
6、向吸附柱内加入500ul 的Buffer GD，室温10 000 rpm离心30 sec，弃收集管中废液。
7、向吸附柱内加入500ul的Buffer PW，室温10000rpm 离心30 sec，弃收集管中废液。
8、向吸附柱中加入500ul 无水乙醇，10000 rpm离心30 sec，倒掉收集管中的废液，将吸附柱重新放回收集管中。
9、室温12000rpm离心3min，甩干残留液体。
10、将离心吸附柱置于一个新的1.5 ml塑料离心管中，小心打开吸附柱的盖子，室温放置3 min,使吸附膜完全变干。加入30~ 100ul的洗脱液，室温放置2~ 5 min。12000 rpm离心1min，离心管底溶液即DNA。

体液病原DNA提取试剂盒的操作步骤：
1、200μl血清等体液（需回复到室温，不足可用0.9%NaCl或者PBS补足）转入上述1.5ml离心管，加入400μl裂解液DLB，立刻涡旋振荡充分混匀。
2、室温(15-25℃)放置10分钟，每隔5分钟，振荡混匀一次。
3、加入450μl无水乙醇，立刻涡旋振荡充分混匀。如果周围环境**25℃，乙醇需要冰上预冷后再加入。
4、将上述混合物加入一个吸附柱AC中，（吸附柱放入收集管中）13000rpm离心30-60秒，倒掉收集管中的废液。如果总体积**过750μl，可分两次将溶液加入同一个吸附柱AC中。
5、加500μl去蛋白液RE，12000rpm离心30秒，弃废液。
6、加入500μl漂洗液WB，12000rpm离心30秒，弃废液，加入500μl漂洗液WB，重复一遍。
7、将吸附柱AC放回空收集管中，13000rpm离心2分钟，尽量除去漂洗液，以免漂洗液中残留乙醇抑制下游反应。
8、取出吸附柱AC，放入一个新的离心管中，在吸附膜的中间部位加30-50μl洗脱缓冲液EB（事先在65－70℃水浴中加热效果更好），室温放置1分钟，12,000rpm离心1分钟。如果想得到较多量的DNA，可将得到的溶液重新加入离心吸附柱中，12,000rpm离心1分钟。洗脱体积越大，洗脱效率越高。如果需要的DNA浓度较高，可以适当减少洗脱体积，但是至小体积不应少于20μl，体积过小降低洗脱效率，减少DNA产量。
9、DNA可以存放在2-8℃，如果要较长时间存放，可以放置在－20℃。

体液病原DNA提取试剂盒的注意事项：
1、血清或血浆避免反复冻融，否则会使蛋白变性或产生沉淀，导致提取的DNA的片段小，提取量下降。
2、如缓冲液Buffer GB、Buffer GD结晶或产生沉淀，可在56"C 水浴溶解。
3、所有离心步骤均为室温下操作。

体液病原DNA提取试剂盒使用事项：
1、样本体积不足200ul可以加入0. 9% NaC1补足。
2、为确保样本有效裂解，加入BufferGB后，需将样本与Buffer GB充分混匀。
3、如果环境温度**过25"C，无水乙醇应在冰上预冷后使用。
4、Buffer GD中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
5、如需进一步提高DNA 纯度，可重复步骤一次。Buffer PW中含有乙醇，用后及时盖紧，以防乙醇挥发。
6、为增加洗脱效率，可将洗脱液在50~60C预热。如需使用去离子水洗脱，可用NaOH调整其pH值在7.0~8.5之间，为了增加DNA回收率，可将得到的溶液重新加入到离心管中，室温放置2min，再次离心收集。

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