体液病原DNA提取试剂盒操作简单、快速,所得病原DNA不含蛋白、核酸酶和其他杂质,可直接用于PCR、RT-PCR、 Real-Time PCR 、印迹等分子生物学实验。
一般来说,核酸分离方法包括酚仿抽提法、冻融法、煮沸法和硅胶膜吸附、磁珠分离等,提取步骤中一般含有细胞裂解、沉淀,离心、漂洗、洗脱、溶解核酸等过程。目前在体液病毒DNA的提取过程中,一般采用硅胶膜吸附或磁珠分离法,经常会用到蛋白酶k加热消化、处理、含醇洗液漂洗、加热洗脱等步骤,操作较为繁琐,现有的一些试剂盒含有具有一些有毒物质,会损害人体健康。另外,受到洗脱液体积的影响,往往难以将回收到的dna全部用于检测,进而影响了检测灵敏度。
体液中病原dna的提取步骤中,去污剂用于破坏细胞或病毒蛋白外壳或膜结构,使核酸游离到溶液中,胍盐或盐用于变性蛋白质,释放其结合的核酸并促进核酸与硅基质膜或磁珠结合,同时也具有裂解病毒外壳或膜结构的功能,如果使用溶剂,也可以破坏细胞结构,变性蛋白质进而释放核酸。
体液病原DNA提取试剂盒保存条件:常温运输和保存,长期放置时(1月以上)应该放4℃。且具有挥发性,使用后需要将瓶盖拧紧。
体液病原DNA提取试剂盒用于从各种液体样品中提取DNA的试剂盒。可以处理各种液体样品(血液,血清,血浆,脑脊液,淋巴液,细胞培养上清液等)、单个或少量的细胞等。提取的DNA与PCR、荧光PCR、RT-PCR、荧光RT-PCR等后续反应兼容。
试剂盒特点:
1.DNA的回收率高。
2.一管式操作,减少了样品污染的可能。
3.一站式套装,降低了实验误差。
4.安全无毒,不需要使用一些溶液。
5.试剂稳定,可以长期放置。
体液病原DNA提取试剂盒的注意事项:
1、血清或血浆避免反复冻融,否则会使蛋白变性或产生沉淀,导致提取的DNA的片段小,提取量下降。
2、如缓冲液Buffer GB、Buffer GD结晶或产生沉淀,可在56"C 水浴溶解。
3、所有离心步骤均为室温下操作。
体液病原DNA提取试剂盒的产品优势:
1、质量优:DNA提取产量高,纯度好,有效去除杂质和下游PCR抑制因子,有效控制外源致病污染;
2、无偏性:无偏倚的微生物核酸提取,兼容多种病原类型,较大程度避免样本中微生物损失;
3、应用广:广泛兼容肺泡灌洗液、痰液、拭子等生物液体样本;
4、高兼容:兼容手动提取及自动提取程序,适配Tecan、Hamilton、PE等核酸提取工作站。
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