济南血浆病原DNA提取试剂盒 经过多次优化处理 去除杂质污染

用于检测或样本较多情况下的检测，操作复杂如果导致交叉污染会引起误诊，还会影响出检测报告的时间。因而，选用操作简便、流畅的血浆病原DNA提取试剂盒非常重要。
游离DNA提取方法一般有TRizol方法、离心柱法、磁珠法。其中，Trizol方法与离心柱相比，提取效果相当，但是因其对操作者带来的毒性，现在越来越被弃用。磁珠法比较适合机器自动化提取，如果没有核酸提取仪，只是使用磁力架配套提取，磁珠法的操作就比较麻烦且容易导致样本交叉污染。另外，根据研究，磁珠法的核酸提取得率不如离心柱法。如果要提取的游离核酸的量比较低，选择离心柱法。对于游离DNA含量较低的样本或比较珍贵的样本或样本总数不是很多的实验室，核酸提取方法应是离心柱法。

实验室工作中，经常会需要用到纯化的DNA，这时我们通常需要使用一个商业的DNA提取试剂盒对目的DNA进行分离纯化。市面上有很多类型的提取试剂盒，当使用不太熟悉的样本类型时，选择合适的盒子是尤为关键的。
目前大多数DNA提取试剂盒遵循相同的基本步骤：裂解、柱纯化、洗涤杂质、柱洗脱。然而，不同的盒子在完成每个步骤的方式上有很大的不同。

不同的DNA来源有不同的试剂盒，从实验室培养的细胞，到土壤样本，甚至指纹，也有许多用于某些应用的试剂盒。例如，土壤中的腐殖酸或血液中的血红蛋白会污染纯化的DNA，从而干扰下游的DNA实验（如PCR）。当然，也有一些试剂盒会在进行纯化步骤之前去除这些组分。如果想从PCR或琼脂糖凝胶中纯化DNA，有许多方法可以提高琼脂糖凝胶纯化的回收率。

一般来说，血清血浆的量与提取的核酸量成正比。因而，如果要提高核酸得率，可通过增加血清或血浆的量来实现。一般地，做血浆或血清核酸提取，样本量在1ml以上。如果1ml或更大量样本得不到满意的检测结果，则应及时考虑更换提取试剂盒。血浆病原DNA提取试剂盒的核酸提取得率较高，1ml病人血浆样本DNA得率在85ng左右，Q的得率在72ng左右，T的得率在63ng左右，基本上都能满足下游PCR实验的需求。其检测下限为2ng/ul。如洗脱液为30ul，则需要1ml左右的血浆才能检测出来。显然，如果是健康人的血浆，1ml血浆的DNA浓度更低。因而，血浆DNA提取完成以后，应该直接做PCR。

血浆病原DNA提取试剂盒有较高的提取得率。核酸提取得率的确定，常用的是使用紫外分光光度计的方法。但是，血清、血浆样本中游离核酸含量较低，如果直接用紫外法检测，得出的数值并不准确，而且多次测量的结果会变异很大。关于提取得率，1ml正常血浆样本cfDNA得为7.35ng左右，但如果白细胞大量凋亡，血浆中的游离DNA量会有所增加，病人血浆中的DNA会大幅增加。

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