血浆病原DNA提取试剂盒提取的核酸纯度高。核酸纯度一般根据OD260/OD280比值来判断。一般说来,试剂盒提取的DNA其OD260/OD280比值应在1.6--1.8之间。
血浆病原DNA提取试剂盒的优势:
1、从血液样本中分离基因组DNA,线粒体DNA,病毒DNA等;
2、样本制备时间少;
3、纯化的DNA具有优异的质量和产量,并且可应用于很多下游应用,包括PCR、qPCR、测序、基因分型、病毒检测、Southern印迹分析。
血浆病原DNA提取试剂盒产品特点:
1、操作简便快速,20分钟左右可获得理想的DNA;
2、提取DNA纯度高,无抑制剂,1.7<A260/A280≤2.0;
3、产量更高,较国内同类产品高出20%;
4、样本范围广,可用于新鲜、冷冻或陈旧的全血样本。
在选择DNA提取试剂盒时,较重要的变量可能是你所使用的生物体。
1、许多试剂盒都有用于DNA分离的不同成分,这些试剂盒之间的主要区别在于细胞是如何被分解的,因为有些比其他更更有挑战性。例如,形成生物膜的可能比传统的基于去垢剂的方法需要更强的裂解技术。
2、动物组织:用于动物组织DNA分离的试剂盒通常具有更温和的裂解技术,因为大多数动物细胞不像细胞那样有细胞壁。然而,动物组织DNA提取的挑战往往在于选择合适的组织匀浆方法。此外,许多动物DNA纯化试剂盒不使用/氯仿萃取或乙醇作为沉淀步骤,以减少破坏DNA的风险。
3、植物:当涉及到植物DNA分离时,必须考虑到其他一些因素,需要注意污染物的去除。植物在纯化过程中通常含有未分离的糖,因此,洗涤剂选择性地与DNA结合并从溶液中析出,通常是先将洗涤剂溶解在高浓度的盐溶液中,然后提取DNA。
4、血液:由于技术上的许多新进展,血液DNA分离试剂盒中有多种裂解技术和提取方法可供选择。从血液中分离出的DNA将在很大程度上决定你使用的裂解和提取的类型。无论应用是什么,一定要选择一种能够提供纯净、完整、双链和浓缩DNA的试剂盒,以获得较好地效果。
游离DNA提取方法一般有TRizol方法、离心柱法、磁珠法。其中,Trizol方法与离心柱相比,提取效果相当,但是因其对操作者带来的毒性,现在越来越被弃用。磁珠法比较适合机器自动化提取,如果没有核酸提取仪,只是使用磁力架配套提取,磁珠法的操作就比较麻烦且容易导致样本交叉污染。另外,根据研究,磁珠法的核酸提取得率不如离心柱法。如果要提取的游离核酸的量比较低,选择离心柱法。对于游离DNA含量较低的样本或比较珍贵的样本或样本总数不是很多的实验室,核酸提取方法应是离心柱法。
血浆病原DNA提取试剂盒有较高的提取得率。核酸提取得率的确定,常用的是使用紫外分光光度计的方法。但是,血清、血浆样本中游离核酸含量较低,如果直接用紫外法检测,得出的数值并不准确,而且多次测量的结果会变异很大。关于提取得率,1ml正常血浆样本cfDNA得为7.35ng左右,但如果白细胞大量凋亡,血浆中的游离DNA量会有所增加,病人血浆中的DNA会大幅增加。
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